分别使用DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)、同类产品AP和An磁珠,进行DNA--片段分选,在不同分选比例条件下,DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)在片段分选效果上表现出高度一致性。
DNA分选纯化试剂盒的测试:
使用Norgen的水RNA/DNA提取纯化试剂盒获得高产量和高纯度的RNA和DNA。 从含有107 cfu/mL大肠杆菌的50mL水样中同时分离总RNA和DNA,随后进行凝胶电泳分析。基因组DNA和16S和23S rRNA条带是可见的。能观察到16S和23S rRNA,没有DNA污染。由此可见,该试剂盒允许分离和纯化高产量和高质量的浓缩RNA和DNA。
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DNA分选纯化试剂盒通过实时PCR(SYBR Green)检测大肠杆菌16SrDNA,通过提供的0.45μm水过滤柱过滤加入过量大肠杆菌的50mL水样,同时分离总RNA和DNA,并进行实时PCR。发现含有不同大肠杆菌量的所有测试水样都对应于实时PCR结果。通过大肠杆菌16S rDNA引物特检测到大肠杆菌,其浓度低至102cfu /ml,表明DNA的高质量和过滤系统的率。
DNA分选纯化试剂盒的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,**过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。
而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候,过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分,导致整个试剂盒效率低下。有很多时候,在提取效果不佳的时候,减少磁珠使用量,反而是提升提取效果的较好途径。
DNA分选纯化试剂盒的生产周期较短,满足了实际生产需求,具有良好的经济性;此外,此工艺操作简单、易于放大、重复性好,并且建立了相应的质粒DNA质量检测体系,对于药用级质粒DNA大规模制备具有重要的现实意义,也为同类研究的进行奠定了理论基础,为进一步的工业化生产提供了借鉴。
提取纯化试剂盒说明:
1、纯化柱-液体输入体积:
650ul;
2、洗脱体积:
100ul;
3、10个样品的纯化时间:
45minutes。
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