武汉磁珠法 能轻松使用 适配多种核酸提取工作平台

带病变基因突变位点的游离DNA 片段以及母血中的少量来源于胎儿的游离循环DNA 片段。这类DNA 片段在疾病的早期诊断、预后、监测等方面具有重要潜在价值。这就体现出了游离DNA提取试剂盒的价值。
游离DNA提取试剂盒的产品特点：
1、采用真空浓缩技术，富集提取液体样本中的低浓度DNA，使DNA的提取量、特别是提取浓度较普通试剂盒大幅提升，有效解决了因DNA浓度较低无法进一步分析和对靶基因进行检测的问题；
2、提取DNA纯度高，无抑制剂，提取的DNA可用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和分子杂交等；
3、适用样本类型广，可有效富集提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、尿液、水样等液体样本中的DNA。

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游离DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取200ul样品加入400μl Buffer ML及300μl异丙醇，漩涡震荡样品管以充分混匀。
2、充分混合震荡磁珠，使管内磁珠完全均匀悬浮起来，取40ul 磁珠加入样品管中，漩涡震荡该管30s使磁珠均匀悬浮于样品管中。1000-2000转离心1-2s收集管盖上的液体。
3、样品管室温放置10分钟。
注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或是漩涡混匀，以保证磁珠对DNA的结合效率。
4、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
5、将装有磁珠的离心管移开磁力架，并确保其中的上清液全部移除。向管中加入600μl的Buffer W1，每秒1-2次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
6、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
7、将装有磁珠的离心管移开磁力架并确保其中的上清液全部移除，向管内加入600ulBuffer W2每秒1-3次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
8、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
9、重复步骤7-8一次，将管内的液体全部吸除干净，并将样品管从磁力架上取出。
10、将样品管于室温放置分钟，使残留Z醇充分挥发。
注：避免真空抽干，磁珠过于干燥将会降低DNA洗脱效率。
11、向管内加入20-100ul Elution Buffer并用移液轻轻吹打5-10次使磁珠充分重悬，操作过程中应避免产生气泡。
12、室温放置1-5分钟以充分洗脱。
注：为了达到产量请在放置期间定时混匀磁珠。
13、将洗脱样品管放回磁力架上1分钟或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
14、小心的将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤13-14。

游离DNA提取试剂盒适用样本类型广，包括血清、血浆、胸腹水、脑脊液、尿液、水样等大部分的生物液体样本。其中，血清、血浆、腹水的提取量为0.3-1.5ml，尿液的提取量为2-10ml，水样的提取量为5-18ml。游离DNA提取试剂盒有效克服了一般试剂盒样本量大、洗脱液多、DNA提取终浓度依然较低的缺点。试剂盒提取体系经多次优化，提取DNA纯度高，可广泛用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和分子杂交等。

游离DNA提取试剂盒储存条件及稳定性：
试剂盒内的磁珠请置于4°C保存，其它组分室温保存即可，如果出现结晶析出现象，需将结晶溶解后使用。在适合的储存条件下该试剂盒未开封使用有效期为1年，开封使用后请于3个月内使用以保证较好地实验效果。
磁珠特性：
适用样品类型：血清及血浆；
表面功能团：羟基；
磁珠浓度：50mg/ml；
磁珠保存液成分：ddH2O；
洗脱体积：20-100ul (可根据客户需要适量增加或是减少)。

游离DNA提取试剂盒采用磁珠纯化技术和特别的缓冲液系统，为从血清或血浆中提取游离循环DNA（free-circulating/cell-free DNA）提供了一种简单、快速、效率的方法。提取过程不涉及酚等试剂，提取的基因组DNA的片段大、纯度高、质量稳定可靠。提取得到DNA的片段既可直接用于PCR扩增，qPCR测定，二代测序（NGS）等下游实验操作，也可置于-20℃储存备用。该试剂盒也可有效的与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用，以进行快速、大样本量的提取。
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