DNA分选纯化试剂盒能从不同类型的水样中发现的所有微生物中分离总DNA和RNA,包括菌类和藻类,使用相同的柱子同时对RNA和DNA进行柱纯化。
DNA分选纯化试剂盒通过实时PCR(SYBR Green)检测大肠杆菌16SrDNA,通过提供的0.45μm水过滤柱过滤加入过量大肠杆菌的50mL水样,同时分离总RNA和DNA,并进行实时PCR。发现含有不同大肠杆菌量的所有测试水样都对应于实时PCR结果。通过大肠杆菌16S rDNA引物特检测到大肠杆菌,其浓度低至102cfu /ml,表明DNA的高质量和过滤系统的率。
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DNA分选纯化试剂盒的检测结果符合药用标准。与传统实验室方法相比,此工艺生产流程可避免使用有毒试剂(氯仿)和动物源性酶类(RNase A),确保了产品的安全性的同时,也减少了检测有毒试剂残余量的繁琐步骤;此工艺使用的大都是价格低廉的国产试剂,所用的材料和设备(凝胶、反应器等),可以反复再生使用。
DNA分选纯化试剂盒的优点:
高回收率:片段回收率、文库大小与进口磁珠高度一致;
高重复性:专为片段筛选研发,片段大小可控,重复性好;
高兼容性:适用于手动及自动化工作流程;
高稳定性:有效去除多余的dNTPs、残留引物、盐离子污染,产物纯净、稳定。
DNA分选纯化试剂盒对于磁珠法而言,每增加一部分液体体积,就减少了更多的磁珠碰撞几率,而降低磁珠碰撞几率,会导致吸附率的大幅度下降。所以很多时候,虽然增加裂解液和洗涤液确实能够起到增强裂解和增强洗涤的作用,但磁珠法提取的核心是磁珠吸附核酸的效率,无法保证磁珠碰撞效率是不能保证核酸提取效率的,所以单纯增加试剂使用量改善提取效果并不一定完全有效。
DNA分选纯化试剂盒的生产周期较短,满足了实际生产需求,具有良好的经济性;此外,此工艺操作简单、易于放大、重复性好,并且建立了相应的质粒DNA质量检测体系,对于药用级质粒DNA大规模制备具有重要的现实意义,也为同类研究的进行奠定了理论基础,为进一步的工业化生产提供了借鉴。
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