苏州磁珠法提取 提取产量高 避免下游PCR抑制因子

带病变基因突变位点的游离DNA 片段以及母血中的少量来源于胎儿的游离循环DNA 片段。这类DNA 片段在疾病的早期诊断、预后、监测等方面具有重要潜在价值。这就体现出了游离DNA提取试剂盒的价值。
目前用于血浆游离DNA提取纯化的方法主要有酚氯仿法、柱提取法和磁珠法，其中 酚氯仿法需要在核酸提取过程中使用对人体有害的溶剂，越来越难以被检验人员接受，而且该方法操作复杂，对于游离DNA来说提取效率较低，需要加大样本量来满足后续检测需求，同时在提取过程中需要进行高速离心操作，难以实现自动化。柱提取法是目前主要 使用的方法，该方法不需要使用毒性较大的溶剂，操作方法较酚氯仿法稍简单，但操作过程中仍然需要进行高速离心，同时提取效率较低，需要加大样本量来满足后续检测的需求，难以实现自动化。游离DNA提取试剂盒的磁珠法近几年才开始应用于DNA的提取，该方法的特点是提取过程不需要进行高速离心，容易实现自动化。

苏州磁珠法提取 提取产量高 避免下游PCR抑制因子-南京兔牙生物科技有限公司
游离DNA提取试剂盒，包含裂解液、洗涤液A、洗涤液B、去抑制剂、磁珠和洗脱液；其中，洗涤液B中醇的浓度可以低于1％，甚至完全不含醇、不含表面活性剂。还有配套使用的，或包含或整合了所述试剂盒的全自动核酸提取系统。特别适合于短片段DNA，例如血浆游离DNA的提取，并且不会影响后续的PCR反应，具有使用安全、简便、快捷、成本低廉等优点。

游离DNA（Cell-Free Circulating DNA，cf-DNA），是一种在细胞外呈现游离状态且无细胞状态的DNA，广泛存在于动植物及人类的血清、血浆、脑脊液、尿液、唾液或粪便当中。患者的血浆和血清中检测到了基因突变，并且与原发基因相一致，因此游离DNA逐渐受到重视。游离DNA已被是一种对于和胎儿以外的众多疾病的有用的生物标志物，包括创伤、败血症、无菌性、心肌梗塞、中风、移植、糖尿病和镰状细胞病等。游离DNA提取试剂盒能有效提取游离DNA，协助研究与诊断。

游离DNA提取试剂盒采用磁珠纯化技术和特别的缓冲液系统，为从血清或血浆中提取游离循环DNA（free-circulating/cell-free DNA）提供了一种简单、快速、效率的方法。提取过程不涉及酚等试剂，提取的基因组DNA的片段大、纯度高、质量稳定可靠。提取得到DNA的片段既可直接用于PCR扩增，qPCR测定，二代测序（NGS）等下游实验操作，也可置于-20℃储存备用。该试剂盒也可有效的与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用，以进行快速、大样本量的提取。

游离DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取200ul样品加入400μl Buffer ML及300μl异丙醇，漩涡震荡样品管以充分混匀。
2、充分混合震荡磁珠，使管内磁珠完全均匀悬浮起来，取40ul 磁珠加入样品管中，漩涡震荡该管30s使磁珠均匀悬浮于样品管中。1000-2000转离心1-2s收集管盖上的液体。
3、样品管室温放置10分钟。
注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或是漩涡混匀，以保证磁珠对DNA的结合效率。
4、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
5、将装有磁珠的离心管移开磁力架，并确保其中的上清液全部移除。向管中加入600μl的Buffer W1，每秒1-2次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
6、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
7、将装有磁珠的离心管移开磁力架并确保其中的上清液全部移除，向管内加入600ulBuffer W2每秒1-3次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
8、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
9、重复步骤7-8一次，将管内的液体全部吸除干净，并将样品管从磁力架上取出。
10、将样品管于室温放置分钟，使残留Z醇充分挥发。
注：避免真空抽干，磁珠过于干燥将会降低DNA洗脱效率。
11、向管内加入20-100ul Elution Buffer并用移液轻轻吹打5-10次使磁珠充分重悬，操作过程中应避免产生气泡。
12、室温放置1-5分钟以充分洗脱。
注：为了达到产量请在放置期间定时混匀磁珠。
13、将洗脱样品管放回磁力架上1分钟或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
14、小心的将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤13-14。
苏州磁珠法提取 提取产量高 避免下游PCR抑制因子-南京兔牙生物科技有限公司

我们公司始终本着诚信经营的原则，以“以诚为本，以质取信”为宗旨，坚持“开拓、务实、守信”的企业精神，以诚挚的心，全方面的服务，为每一个客户创造高价值，让客户来的放心，用的舒心。与您携手共进。