异硫氰酸胍法 硫氰酸胍

武汉卡诺斯科技有限公司

异硫氰酸胍是一种化学物质，分子式是CH5N3·HSCN。

异硫氰酸胍
外文名 Guanidine isothiocyanate
分子式 CH5N3·HSCN
分子量 118.16
CAS:593-84-0
简称 GITC
外观:白色结晶
熔点:115-120℃
PH(4%水溶液):4.5-7.0
紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit
紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit
干燥失重:≤0.5%
用途：用于变性裂解细胞；提取RNA和DNA。无RNA酶和DNA酶活性

TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能*破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。

消化方法：用50～100ul细胞悬液及血清，加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后，或65℃1小时，或室温放置数分钟，然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的缓冲液，再加等体积的酚：氯仿，用力振摇约10s，10000r/min，离心5min，取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后，14000r/min离心15min，沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1～2次，真空干燥，沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增，或放-20℃保存。