紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit
消化方法:用50~100ul细胞悬液及血清,加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后,或65℃1小时,或室温放置数分钟,然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的缓冲液,再加等体积的酚:氯仿,用力振摇约10s,10000r/min,离心5min,取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后,14000r/min离心15min,沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1~2次,真空干燥,沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增,或放-20℃保存。
1.异硫氰酸胍消化液
异硫氰酸胍4mol/L
简称 GITC
外观:白色结晶
熔点:115-120℃
PH(4%水溶液):4.5-7.0
紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit
紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit
干燥失重:≤0.5%
用途:用于变性裂解细胞;提取RNA和DNA。无RNA酶和DNA酶活性